**荧光实验原理
**荧光(IF)是使用显微镜深入了解细胞结构和过程的有效方法。此方法可评估特定蛋白质的表达和位置，使得**荧光成为科学家解决许多细胞生物学问题不可或缺的工具。
**荧光实验基于以下主要步骤：
1.特异性抗体与感兴趣的蛋白质结合。
2.荧光染料与这些**复合物偶联，以便使用显微镜观察感兴趣的蛋白质。
内皮细胞中vWF的**荧光染色。肌动蛋白用phalloidin染色(绿色)，细胞核用DAPI染色(蓝色)。
区分直接和间接**荧光。在直接**荧光中，一抗直接偶联到荧光团（也称为荧光色素），便于处理和快速可视化。在间接**荧光中，使用特异性结合一抗的二级荧光团偶联抗体来可视化感兴趣的结。
尽管**种方法比直接**荧光更耗时，但它有几个显著的优势，比如它通常更便宜，因为二抗可以用于不同的一抗。此外，通过结合多个一抗和特定的二抗(每个抗体都用不同的荧光团标记)，可以在单个样品中平行特异地显示多个蛋白质(多色**荧光)。
**荧光染色:典型的工作流程
每个**荧光染色方案由培养、固定、染色、成像四个主要步骤组成，可细分如下:
**荧光染色是一种非常敏感的方法，可能需要排除故障《**英冠染色故障排除指南》。方案中的微小变化可能会导致不同的结果，而这些结果不再具有可比性。因此，在您的特定方案中**地保持完全相同的条件是非常重要的(例如，细胞密度、抗体稀释度、培养温度和培养时间)。
**荧光实验方案对比
传统染色与ibidi方案染色
当使用任何ibidi解决方案时，ibidi的**荧光染色方案比传统方案要简便快速的多。无需在松散的盖玻片上生长细胞，细胞可直接在ibidi玻片上生长和染色。
用于**荧光应用的各种ibidi产品
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参考文献
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C. Xu, et al. NPTX2 promotes colorectal cancer growth and liver metastasis by the activation of the canonical Wnt/beta-catenin pathway via FZD6. Cell Death & Disease, 2019, 10.1038/s41419-019-1467-7
Kobayashi, T., et al. Principles of early human development and germ cell program from conserved model systems. Nature, 2017, 10.1038/nature22812
H. Tada et al. Porphyromonas gingivalis Gingipain-Dependently Enhances IL-33 Production in Human Gingival Epithelial Cells. PloS one, 2016, 10.1371/journal.pone.0152794
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